近年来，不管是“80后”还是“90后”都希望通过化妆品来延缓皮肤衰老。皮肤衰老表现之一就是出现皱纹，因此抗皱成为消费者的一大需求。欧盟、韩国和日本等组织和国家已经建立了抗皱化妆品功效评价指南，或推出了功效原料清单，而我国尚无相关法规出台，因此加强对抗皱功效方法的研究将会更有利于抗皱化妆品的监管和市场的良性发展。抗皱产品的评价方法主要有体外法和在体法两种。

体外法

抗皱功效实质上是抗衰老功效的细化分支，因此在体外功效评价方法上存在很多共性。体外评价方法包括生物化学法、细胞生物学法和三维重组皮肤模型替代法等^[1]。目前，对抗衰的研究已经从表观形态深入到使用产品前后皮肤深层结构的变化。在化妆品抗皱细胞实验中，通常使用人皮肤角质形成细胞、成纤维细胞或三维重组皮肤模型，研究抗皱成分对细胞的生长增殖的影响。

01 生物化学方法

生物化学法一般包括清除自由基实验、超氧阴离子自由基实验、羟自由基实验、氧自由基吸附能力实验^[2]、抑制金属蛋白酶和弹性蛋白酶实验^[3]。

皱纹的产生与皮肤老化有关，而自由基是导致皮肤过早老化的最大原因之一。方法中清除自由基实验、超氧阴离子自由基实验、羟自由基实验、氧自由基吸附能力实验都是从自由基角度间接对抗皱功效进行评价。

基质金属蛋白酶MMPs是一类生物活性依赖于锌离子、有降解细胞外基质能力的内肽酶家族^[4]。MMPs分泌增加会加速胶原蛋白的降解,造成皮肤胶原蛋白流失,皮肤松弛,弹性下降,细纹增多且不断加深。弹性蛋白酶作为具有极高选择性和专一性的蛋白分解酶，可以使结缔组织蛋白质中的弹性蛋白分解，导致皮肤衰老。因此可以通过抑制金属蛋白酶和弹性蛋白酶的能力大小评价化妆品的抗皱功效。

生化试验的主要优点是体外操作，方法简单，易于实现；缺点是不能完全反映人体内清除自由基和抗氧化能力的情况，最好与其他方法结合使用。

02 细胞生物学法

细胞培养一般是将抗皱功效添加剂溶于水或有机溶剂后用于培养细胞，皮肤模型还可将活性物质配成霜等剂型，涂于重建皮肤模型。通过观察化妆品对细胞增殖分化能力的影响测试相关指标，如清除自由基能力、抗氧化能力和胶原蛋白含量^[5]，评价抗皱活性成分的功效性。细胞培养相比于生物化学实验，更接近于生物体，可用于毒性分析和功效测试，是保证化妆品安全功效的重要手段，但也存在多细胞共培养技术不成熟、无法达到毒理评估标准、组织结构较简单、各细胞层分化不良以及某些标志物不规则表达的缺点。

03 皮肤模型法

欧美等国家都鼓励采用动物替代方法，欧盟已下令全面禁止通过动物实验进行化妆品研究，皮肤模型法将是一种用于化妆品研究的可用替代法。实验时将人造皮肤模型在含抗皱活性成分的条件下培养，或者将含抗皱活性成分的配方涂抹于人造皮肤模型上，通过测试细胞活力和细胞抗氧化等指标来评价抗皱活性成分的功效。Grazul-Bilska等^[6]就通过将保湿面霜涂于EpiDerm 3D皮肤模型上对产品功效进行评价，发现其产品总抗氧化能力明显增强。

在体法

在体法，即人体试用试验，指在志愿者试用基础上，通过考察皮肤状态参数变化对化妆品功效进行评价。目前，抗皱功效评价常用的是快速成像的方法，如三维成像分析法、轮廓仪测量法等^[7]。

01 保湿试验

保湿试验主要是进行皮肤水分含量(MMV)测试和经皮皮肤水分散失(TEWL)测试，通过对使用产品前后角质层含水量的变化情况和皮肤屏障功能的好坏来评价化妆品的人体皮肤保湿功能。皮肤干燥会引起皮肤皱纹,角质层含水量处于10%~30%之间的是健康皮肤,若低于10%，皮肤就会粗糙，进而变得容易出现细纹。保湿试验简单易于操作，但是同样需要结合其他功效评价方法同时使用。

02 弹性测定试验

弹性测定试验主要包括吸力法、扭力法和测量弹性切力波传播速度法。测试时通过皮肤拉伸长度和时间的关系曲线得到皮肤的弹性参数，该方法简便迅速，测量不受皮肤厚度影响，对于研究皮肤老化来说是一个较好指标，缺点是测试部位较有局限，并且无法对较硬皮肤完成测量。

03 直接评价法

首先要对皮肤皱纹的轻重程度制定统一的评分标准，研究人员根据该标准直接对使用产品前后的受试者皱纹或皱纹照片进行等级评分，此方法简单，容易操作，不需要复杂设备，结果具有一定的可重复性，但需熟练的评分人员，且科学性差。

04 快速成像分析法

利用三维皮肤快速成像系统和计算机处理图像得到的皱纹参数是抗皱功效测试的常用方法，具有快速、稳定、精确、可靠、高分辨率等诸多优点，且检测方法快速简单、直接客观，对受试者无负面影响，是一种比较好的直接非接触测量方法。常用的图像采集方法是利用图像采集仪器获得条纹光投影下皮肤三维图像，如加拿大LMI公司的皮肤快速光学成像系统Primos。此外，通过光度立体测量进行3D测量的轻便便携式集成系统法国Pixience公司的多功能皮肤成像分析系统C-Cube等仪器对皮肤纹理度、皱纹等参数均可快速、稳定、精确、可靠测量。三维成像分析法更便于人机交互和直观的图像分析。

图：口周皮肤三维成像图^[8]

结语

随着科学技术的不断发展，抗皱化妆品的评价方法越来越多。抗皱功效评价的总体趋势是以直接测量法逐渐取代模型间接测量法，动物试验部分尽量用其他方法替代，评价方法朝着更简单、客观、直观、易于操作的方向发展。相信只有应用更加规范的评价方法，才能使消费者选用到放心的化妆品，才能提高企业对抗皱化妆品的研发水平，才能促使我国化妆品市场更加公平和健康地发展。

*本文所用图片均来自网络

参考文献

转载自：药大妆研

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